Рнк терапия что это

РНК-терапия

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

“Однажды, давным-давно, РНК научились двигаться. Так и началась жизнь”
— Гарри Ноллер

Вашему вниманию представляется совместный проект Cell Picture Show и Института РНК-терапии Медицинской школы Массачусетского университета в Вустере (Массачусетс, США). Объединяясь с клиницистами, специалисты в области фундаментальных и прикладных исследований нуклеиновых кислот ведут поиск новых лекарственных препаратов. Совместной целью учёных и врачей является создание новой парадигмы для организации молекулярных исследований, которая позволила бы как можно скорее применять новые открытия в биологии для решения проблем здоровья человека. В данном выпуске Cell Picture Show показаны прекрасные микрофотографии, отображающие все области исследований, которые проводит Институт РНК-терапии: от осложнений течения беременности до нейродегенеративных заболеваний.

1. Магистрали киРНК

Socheata Ly, Anastasia Khvorova Lab,
RNA Therapeutics Institute, UMass Medical School

Сегодня мы способны применять РНК-терапию; мы знаем роль РНК и можем использовать их для специфичного сайленсинга (“замалчивания”) генов, отвечающих за болезни. Сама концепция относительно проста: выбирается РНК-мишень, создаётся комплементарная ей последовательность, изменяется экспрессия генов и ген, отвечающий за болезни, замалчивается. Однако в реальности всё сложнее. Одним из препятствий, которые необходимо преодолеть, является доставка этих РНК-блокирующих молекул к их предполагаемой цели (или целям). Лаборатория Хворовой работает над стратегиями успешной доставки этих молекул в различные органы и клетки, где происходит экспрессия генов, отвечающих за заболевания.

Изображение: Микроскопия структурированного освещения (SIM-микроскопия) клетки линии COS-7, экспрессирующей маркер ранних эндосом GFP-EEA1 (зелёный), после обработки флуоресцентно меченными, химически модифицированными короткими интерферирующими РНК, киРНК (красный). Большая часть поглощённых киРНК проходит через эндосомы, в которых преобладает EEA1. Ядро окрашено DAPI (синий) — флуоресцентным красителем для ДНК.

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

2. RIBO-коп

Andrei Korostelev
RNA Therapeutics Institute, UMass Medical School

Рибосомы — важный компонент для поддержания жизни. Их функция заключается в расшифровке генетического кода РНК для создания белков. В Лаборатории Коростелева доказали существование механизма, с помощью которого рибосомы сохраняют точность генетического кода. Поскольку рибосомы корректируют свои инструкции, периодически могут возникать “грамматические ошибки”: при воздействии неверной “буквой” рибосомы не могут правильно закрепиться, и “буква” стирается.

Изображение: Рентгеновская кристаллография, показывающая структуру рибосомы.

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

3. Распределяй хромосомы и размножайся

Cansu Colpan, Phillip Zamore Lab
RNA Therapeutics Institute, UMass Medical School

Сперматозоиды проходят долгий путь, чтобы достичь своего Святого Грааля — яйцеклетки. Вот снимок только одной из их задач во время мейоза. Стадия профазы сперматогенеза состоит из четырёх фаз: лептотены, зиготены, пахитены и диплотены. Здесь, на препарате яичек мыши, показаны все четыре стадии расхождения хромосом в мейозе. Начиная с лептотены (верхний ряд) и в зиготене (второй ряд) гомологичные хромосомы образуют пары, также называемые зиготеновым букетом, поскольку теломеры группируются на одном конце ядра. На стадии пахитены (третий ряд) спаренные хромосомы сокращаются и конденсируются. Наконец, на стадии диплотены (четвёртый ряд) спаренные хромосомы начинают разделяться на две пары хроматид и формируются хиазмы (точка, в которой две гомологичные хроматиды обмениваются генетическим материалом в ходе кроссинговера).

Изображение: Сперматоциты окрашивались DAPI (синий), антителом anti-SYCP3 (зеленый) и антителом γ-H2AX (красный), а затем визуализировались методом флуоресцентной микроскопии. На стадии лептотены каждая хромосома видна как две тонкие нити.

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

4. Молчание — розовое

Julia Alterman, Bruno Godinho, Matthew Hassler, and Socheata Ly; Anastasia Khvorova Lab
RNA Therapeutics Institute, UMass Medical School

С 1998 года, когда Крейг Мелло и Эндрю Фаер (Craig Mello and Andrew Fire) открыли РНК-интерференцию (RNAi), исследователей очень интересует возможность применения этого механизма для лечения заболеваний. РНК-интерференция представляет собой молекулярный путь, в процессе которого можно подавить экспрессию (т.е. осуществить сайленсинг) гена путём использования различных типов РНК, включая микроРНК (miRNA) и короткие интерферирующие РНК (киРНК, siRNA). При активации этого пути RNAi способна подавить экспрессию практически любого гена-мишени, в том числе генов заболеваний, которые обычно считаются фармакологически “неизлечимыми”. В настоящее время Лаборатория Хворовой работает над режимом доставки этих потенциальных терапевтических средств для лечения множества заболеваний.

Изображение: Микроскопия структурированного освещения (SIM-микроскопия) флуоресцентно меченных, химически модифицированных киРНК (красный) в нейронах коры головного мозга мыши после однократного введения метки в полосатое тело. Ядро окрашено DAPI (синий).

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

5. Симфония № 70S в Рибо-мажоре

Andrei Korostelev
RNA Therapeutics Institute, UMass Medical School

Рибосомы можно сравнить с дирижёром, управляющим исполнением симфонии, ведь процесс трансляции белков не менее сложен. Рибосома управляет множеством молекулярных инструментов (например, мРНК и тРНК), что приводит к успешному исполнению верной мелодии (синтезу белков с правильной аминокислотной последовательностью). Это впечатлило бы даже Йозефа Гайдна!

Изображение: Крио-ПЭМ (просвечивающая электронная микроскопия) нуклеотидов субъединицы 70S рибосомы.

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

6. Найти и спасти

Andrew Coles and Jovenal San Agustin, Anastasia Khvorova and Gregory Pazour Laboratories
UMass Medical School

Геном человека весьма богат информацией. Он состоит из 3 миллиардов пар оснований, распределённых по 23 парам хромосом. Каждая хромосома включает сотни и тысячи генов, кодирующих инструкции для создания белков. Чтобы разработать терапию конкретных заболеваний, сначала необходимо в этом огромном архиве данных найти повреждённые гены. За последнее десятилетие было создано множество инструментов для поиска, замены или включения/выключения таких генов, приводящих к заболеваниям. Можете считать это личным гугл-поиском для ваших клеток.

Изображение: Мышам подкожно вводили фосфохолин-содержащий конъюгат докозагексаеновой кислоты (DHA) и гетерогенных коротких интерферирующих РНК (hsiRNA) (PC-DHA-hsiRNA, красный). Почки извлекали, фиксировали и окрашивали LTA (зеленый, проксимальные канальцы), DAPI (синий) и T1α (белый, почечные тельца).

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

7. Не убивайте матричную РНК

David Grunwald
RNA Therapeutics Institute, UMass Medical School

Матричную РНК (мРНК) можно рассматривать как генетические инструкции клетки, которые экспортируются ядром и предназначены для трансляции в белки “фабриками” под названием рибосомы. Благодаря фундаментальным исследованиям, выявившим механизмы трансляции белка с помощью запрограммированных инструкций мРНК, сегодня мы можем применять эти знания для разработки вакцин и других препаратов для лечения таких заболеваний, как рак и вирусная инфекция Зика.

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

8. Молчание генов

Julia Alterman, Anastasia Khvorova Lab
RNA Therapeutics Institute, UMass Medical School

Одной из проблем при разработке препаратов для РНК-терапии выступает возможность доставки препарата к определённым тканям организма. В настоящее время Лаборатория Хворовой работает над модификацией молекул РНК, которая обеспечит их более эффективную доставку к тканям, таким как мозг. На фотографиях показан мозг мыши, в котором после введения в спинномозговую жидкость киРНК, для которых непосредственной мишенью является ген Htt, отвечающий за болезнь Гентингтона, происходит сайленсинг этого гена.

Изображение: Флуоресцентная микроскопия срезов мозга мыши (синий — ядро, розовый — киРНК, направленные на Htt).

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

9. Один раз отрежь

Wen Xue
RNA Therapeutics Institute, UMass Medical School

Сегодня CRISPR пользуется особой популярностью. Исследователи используют технологию CRISPR/Cas9 для редактирования генома, позволяющего модифицировать гены в живых клетках и организмах. Возможно, в будущем реальностью станет исправление мутаций в конкретных точках генома человека, позволяющее устранить генетическую причину заболевания.

Изображение: Срез ткани после иммуногистохимического окрашивания. Опухоль лёгкого дала положительный результат на маркер жёлчных протоков и холангиокарциномы, цитокератин 19 (Ck19, коричневый). Изображения получены при помощи световой микроскопии (объектив 10×).

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

10. Прикрой свои хромосомы!

Anastassiia Vertii, Paul Kaufman Lab
UMass Medical School

Во время митоза хромосомы покрывает загадочный слой белков, известный как перихромосомный слой. Многие из этих белков являются важными компонентами различных клеточных процессов, включая синтез матричной РНК, сборку рибосом, восстановление двухцепочечных разрывов ДНК, поддержание теломер и регуляцию апоптоза.

Изображение: Маркер пролиферации Ki67 — один из лучших примеров ядрышковых белков, которые в митозе мигрируют с образованием перихромосомного слоя. Одиночная плоскость изображения, полученного при конфокальной микроскопии клетки линии RPE-1 в митозе; иммунное окрашивание антителом против Ki67.

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

11. Танец Гентингтона

Marie-Cecile Didiot, Anastasia Khvorova Lab
RNA Therapeutics Institute, UMass Medical School

Симптомы хореи Гентингтона (ХГ) были описаны ещё в XVI веке. Термин “хорея”, по-гречески — “танец”, использовался для описания нарушений координации движений, характерных для ХГ. Из-за неустановленной природы этой болезни больных иногда обвиняли в одержимости дьяволом, а в XVII веке некоторые из них даже преследовались как ведьмы.

Применение RNAi для исследований в области неврологии было ограничено из-за отсутствия простых и эффективных методов доставки олигонуклеотидов в мозг. Гидрофобная модификация киРНК (hsiRNA) — достижение Лаборатории Хворовой — позволяет нейронам поглощать киРНК при захвате холестерина без необходимости в переносчике. Учёные выявили функциональные hsiRNA, нацеленные на мРНК гентингтина, для специфичного сайленсинга этого гена (мутация гена гентингтина отвечает за болезнь Гентингтона).

Изображение: Поглощение hsiRNA к гентингтину в течение 1 часа в клетках линии HeLa (синий — ядро, красный — hsiRNA, зеленый — эндоплазматический ретикулум).

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

12. Смысловые или антисмысловые?

Mike Moazami, Jonathan Watts Lab
RNA Therapeutics Institute, UMass Medical School

Антисмысловые олигонуклеотиды представляют собой одноцепочечные ДНК или РНК, комплементарные определённой последовательности. Антисмысловые олигонуклеотиды блокируют трансляцию белков, связываясь со специфическими последовательностями матричных РНК, в то время как для антисмысловой ДНК мишенью может выступать специфическая комплементарная РНК. Как вы можете себе представить, нацеливание на специфичные последовательности, кодирующие гены болезни, открывает убедительную терапевтическую стратегию для многих заболеваний.

Изображение: Инвертированная микроскопия мозжечка мыши после инъекции в желудочки головного мозга (ядро — синий, белок гентингтин — фиолетовый, меченный Cy5 антисмысловой олигонуклеотид — зелёный).

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

13. Становясь вирусными

Jill Perreira, Abraham Brass Lab
UMass Medical School

Белок RNASEK, расположенный на поверхности клетки, необходим для эндоцитоза, или поглощения клеткой молекул. RNASEK также требуется для внедрения в клетку через эндосомы и последующей репликации определённых вирусов, таких как вирус гриппа A, вирус лихорадки денге и риновирус человека (ответственный за 50% случаев простуды). В недавней статье Cell Reports, используя короткие интерферирующие РНК (киРНК) для сайленсинга белка RNASEK, Лаборатория Брасса показала, что утрата этого белка предотвращает репликацию нескольких патогенных вирусов.

Изображение с высоким разрешением получено с использованием системы “OMX: DeltaVision Localization Microscopy” и метода белковой комплементации световой микроскопии (CALM): Микроскопия нижней поверхности клетки линии HeLa. Реконструкция псевдоокрашена, чтобы привлечь внимание к отдельным структурам.

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

14. Видим яснее

Marie-Cecile Didiot, Anastasia Khvorova Lab
RNA Therapeutics Institute, UMass Medical School

Последние достижения технологии микроскопии сегодня позволяют визуализировать буквально любую молекулу РНК. Такой метод называется «RNAscope» и представляет собой высокочувствительный метод гибридизации in situ. Исследователи из Лаборатории Хворовой используют эту технологию для определения локализации специфических мРНК при различных нейродегенеративных заболеваниях.

Изображение: Визуализация мРНК Hprt в первичных нейронах с использованием конфокального микроскопа (ядро — синий, мРНК Htt — зеленый, мРНК Hprt — красный).

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

15. Светящийся червь

HeeSun Kim, Craig Mello Lab
RNA Therapeutics Institute, UMass Medical School

Червячка-нематоду C. elegans используют в качестве модельного организма для исследования дифференцировки и коммуникации эмбриональных клеток в ходе развития. Внедрение кодирующей последовательности зелёного флуоресцентного белка в локус pie-1 генома нематод с помощью технологии CRISPR/Cas9 позволяет визуализировать гонады взрослых и эмбриогенез в ходе жизни C. elegans.

Изображение: PIE-1 экспрессируется во время пахитены (мейоза зародышевых клеток) и после оплодотворения во время эмбриогенеза распределяется между бластомерами зародышевой линии (P1, P2, P3 и P4) и двумя дочерними клетками P4 (Z2/Z3, первичные зародышевые клетки). Штамм PIE-1::GFP был создан с помощью CRISPR/Cas9-опосредованной гомологичной рекомбинации: кодирующая последовательность gfp (зелёного флуоресцентного белка) встраивалась в эндогенный локус pie-1 непосредственно перед стоп-кодоном. Изображения получены с помощью сканирующего блока конфокальной системы, установленного на инвертированном микроскопе с объективом 40×.

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

16. Спасти рибосомы

Gabriel Demo, Andrei Korostelev Lab
RNA Therapeutics Institute, UMass Medical School

Рибосомы часто считают молекулярными фабриками клетки, которые расшифровывают инструкции, закодированные в РНК и «переводят» их в белок. Рибосома, осуществляющая трансляцию, распадается либо доходя до конца цепи мРНК, либо из-за клеточного стресса, преждевременного прекращения транскрипции, расщепления мРНК или в результате других причин. Лаборатория Коростелева работает над выяснением механизма спасения рибосом от разрушения и повторного их применения для трансляции.

Изображение: Крио-ПЭМ (просвечивающая электронная микроскопия) с разрешением 3.2 Å структуры субъединицы 70S рибосомы E. coli, связанной с ArfA и рилизинг-фактором RF2.

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

17. Превратим кожу в клетки мозга?

Marie-Cecile Didiot, Anastasia Khvorova Lab
RNA Therapeutics Institute, UMass Medical School

Проблемой исследований нейродегенеративных заболеваний остаётся нехватка доступных для экспериментов образцов от пациентов. Одним из способов борьбы с этой проблемой исследователи из Лаборатории Хворовой называют применение способности клеток кожи (фибробластов) пациентов с болезнью Гентингтона к трансформации в клетки головного мозга (нейроны), подходящие для изучения заболевания.

Изображение: Световая микроскопия фибробластов, перепрограммированных путём гиперэкспрессии miR-9 и miR-124, а также четырёх нейрональных транскрипционных факторов для запуска преобразования в нервные клетки. Изображения показывают трансформацию по дням: 0 (вверху слева), 9 (вверху справа), 19 (внизу слева) и 26 (внизу справа). На 26 день наблюдается полная трансформация нейронов. Протокол, основанный на статье Richner et al., (2015).

Источник

ProQR Therapeutics: лечение наследственных заболеваний зрения методом РНК-терапии

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

В последние десятилетия произошел огромный прогресс в лечении заболеваний сетчатки глаза. По мнению многих экспертов, самым перспективным направлением здесь является генная терапия, с помощью которой можно лечить наследственные заболевания зрения. Скоро будет возможно остановить прогрессирование таких тяжелых заболеваний, как пигментный ретинит, пигментная абиотрофия, болезнь Штаргардта, амавроз Лебера. Эти заболевания либо приводят к существенному сужению поля зрения, либо к выпадению центрального зрения, либо к слепоте.

По мнению исследователей, сетчатка очень чувствительна к генетическим мутациям и поэтому является идеальной мишенью для такой терапии. Особенно на ранних стадиях заболевания сетчатки, когда функция фоторецепторов еще сохранена, при помощи генной терапии можно добиться лучших результатов, чем на поздних стадиях, когда ни фоторецепторы, ни клетки пигментного эпителия уже не могут отвечать на лечение.

Под термином «генная терапия» подразумевают внедрение в пораженную клетку новой ДНК, или включение в работу собственных генов, которые до этого не функционировали, или установку новых, так называемых, терапевтических генов. Основные проблемы, сдерживающие сегодня развитие этой терапии, – ограниченная возможность мониторинга генов, для обеспечения максимальной безопасности и оценка эффективности выбранных подходов.

РНК-терапия

Одной из организаций, которая занимается разработкой генной терапии для лечения заболеваний сетчатки является нидерландская компания ProQR Therapeutics, которая специализируется на РНК-терапии. РНК-терапия предназначена для исправления мутаций в РНК человека с генетическим заболеванием. Исправив ошибку, РНК может быть использована для создания белка, который нужен клетке, отнимая основную причину заболевания. В РНК-терапии компании ProQR Therapeutics используются антисенсорные олигонуклеотиды, которые специально разработаны для коррекции основной причины заболевания в РНК человека, чтобы остановить прогрессирование заболевания или даже повернуть вспять симптомы.

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

При заболеваниях сетчатки глаза препарат РНК-терапии можно вводить в стекловидное тело глаза, которое представляет собой полость, заполненную жидкостью, похожей на желе. Этот метод доставки известен как интравитреальная инъекция. Интравитреальная инъекция является одной из наиболее часто выполняемых процедур при глазных заболеваниях. В отдельных случаях используется субретинальная инъекция, которая требует сложной операции на сетчатке.

Программы ProQR создания препаратов для лечения наследственных заболеваний зрения

Sepofarsen (QR-110)

На сегодняшний день не существует официально разрешенного к использованию лечения этой болезни, которая начинается в раннем детстве и приводит к тяжелым поражениям зрения. В Европе и США на сегодняшний день, в соответствии с оценкой ProQR, живут около 2000 людей с этим редким заболеванием.

В настоящее время проводится фаза 2/3 исследования этого препарата, в котором принимают участие около 30 пациентов, включая взрослых и детей (в возрасте от 8 лет и старше). Эта фаза исследования является вторым клиническим исследованием для изучения сепофарсена и ставит своей целью изучение того, является ли исследуемая РНК-терапия эффективной и безопасной для людей.

На первом этапе исследования участвовали 10 пациентов с заболеванием амаврозом Лебера типа 10. Согласно заявлению компании, после трех месяцев лечения у примерно 60% пациентов отмечен клинически заметный отклик на препарат с улучшением зрения и возможности ориентироваться в пространстве. Как отмечается в сообщении ProQR, заметно «быстрое и устойчивое улучшение в каждой метрике оценки зрения».

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

QR-421a

Это РНК-терапия, целью которой является предотвращение потери зрения или восстановление зрения у пациентов с пигментным ретинитом и синдромом Ашера 2-го типа, вызванными мутацией в экзоне 13 гена USH2A.

В настоящее время проводится фаза 1/2 исследования этого препарата. В этом первом тестировании препарата на людях в рамках международного рандомизированного исследования двойным слепым методом принимают участие 14 взрослых пациентов.

В этом исследовании, которое продолжается в течение 24 месяцев, оценивается безопасность и эффективность однократной внутривитреальной инъекции нескольких вариантов дозировки препарата QR-421a

Препарат QR-421a, представляющий собой олигонуклеотид на основе РНК, предназначен для лечения синдрома Ашера 2-го типа и несиндромного пигментного ретинита, вызванных мутацией 13 экзона гена USH2A, что, в свою очередь, является причиной нарушения выработки белка USH2A и потери зрения.

Промежуточные данные, полученные на основе 9- или 3-месячных измерений параметров, свидетельствуют, что двое из восьми пациентов, получавших лечение препаратом QR-421a, по одному в каждой когорте, продемонстрировали положительный эффект по различным показателям.

QR-1123

Это РНК-терапия, целью которой является предотвращение потери зрения или восстановление зрения у пациентов с пигментным ретинитом, вызванным мутацией Р23Н в гене RHO (родопсина).

В настоящее время начата фаза 1/2 исследования этого препарата. Это первое испытание на людях нового препарата и в нем принимает участие до 35 пациентов с аутосомно-доминантным пигментным ретинитом, вызванным мутацией P23H в гене родопсина. Участники исследования поделены на несколько групп, членам которых будут введены одиночные и множественные дозы препарата различного объема.

Действие QR-1123 направлено на блокирование экспрессии токсичного мутированного белка родопсина в сетчатке, который является основной причиной потери зрения, связанной с аутосомно-доминантным пигментным ретинитом.

Хотите больше новостей? Подпишитесь на наши новости на Facebook и Вконтакте.

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

Присоединиться

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

Темы новостей

Последние материалы

Справочник

Рекомендуем

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

Договор № 1
публичная оферта о добровольном пожертвовании

от «01» октября 2016 г.

Межрегиональная общественная организация содействия и помощи больным с наследственными заболеваниями сетчатки «Чтобы видеть!» (МОО «Чтобы видеть!»), именуемая в дальнейшем «Благополучатель» в лице Президента Байбарина Кирилла Александровича, действующего на основании Устава, настоящим предлагает физическим и юридическим лицам или их представителям, именуемым в дальнейшем «Жертвователь», совместно именуемые «Стороны», заключить Договор о добровольном пожертвовании на нижеследующих условиях:

1. Общие положения о публичной оферте

1.1. Данное предложение является публичной офертой в соответствии с пунктом 2 статьи 437 Гражданского Кодекса РФ.
1.2. Акцептом (принятием) настоящей оферты является осуществление Жертвователем перечисления денежных средств на расчётный счёт Благополучателя в качестве добровольного пожертвования на уставную деятельность Благополучателя. Акцепт данного предложения Жертвователем означает, что последний ознакомился и согласен со всеми условиями настоящего Договора о добровольном пожертвовании с Благополучателем.
1.3. Оферта вступает в силу со дня, следующего за днём её публикации на официальном сайте Благополучателя – looktosee.ru, именуемом в дальнейшем «Сайт».
1.4. Текст настоящей оферты может быть изменен Благополучателем без предварительного уведомления и действует со дня, следующего за днём его размещения на Сайте.
1.5. Оферта действует до дня, следующего за днем размещения на Сайте извещения об отмене Оферты. Благополучатель вправе отменить Оферту в любое время без объяснения причин.
1.6. Недействительность одного или нескольких условий Оферты не влечёт недействительности всех остальных условий Оферты.
1.7. Принимая условия данного соглашения, Жертвователь подтверждает добровольный и безвозмездный характер пожертвования.

2. Предмет договора

2.1. По настоящему договору Жертвователь в качестве добровольного пожертвования перечисляет собственные денежные средства на расчётный счёт Благополучателя, а Благополучатель принимает пожертвование и использует на уставные цели.
2.2. Выполнение Жертвователем действий по настоящему договору является пожертвованием в соответствии со статьей 582 Гражданского кодекса Российской Федерации.

3. Деятельность Благополучателя

4. Заключение договора

4.1. Акцептовать Оферту и тем самым заключить с Благополучателем Договор вправе физические и юридические лица или их представители.
4.2. Датой акцепта Оферты и соответственно датой заключения Договора является дата зачисления денежных средств на расчетный счёт Благополучателя либо, в соответствующих случаях, на счет Благополучателя в платежной системе. Местом заключения Договора считается город Москва Российской Федерации. В соответствии с пунктом 3 статьи 434 Гражданского кодекса Российской Федерации Договор считается заключенным в письменной форме.
4.3. Условия Договора определяются Офертой в редакции (с учётом изменений и дополнений), действующей (действующих) на день оформления платёжного распоряжения или день внесения им наличных денег в кассу Благополучателя.

5. Внесение пожертвования

5.1. Жертвователь самостоятельно определяет размер суммы добровольного пожертвования (разового или регулярного) и перечисляет его Благополучателю любым платёжным методом, указанным на сайте looktosee.ru на условиях настоящего Договора. Согласно статье 582 Гражданского кодекса Российской Федерации пожертвование НДС не облагается.
5.2. Назначение платежа: «Пожертвование на уставную деятельность. НДС не облагается» или «Добровольное пожертвование на уставную деятельность» или «Добровольное пожертвование на уставные цели».
5.3. Пожертвования, полученные Благополучателем без указания конкретного назначения, направляются на достижение уставных целей Благополучателя
5.4. Жертвователь имеет право по своему усмотрению выбрать объект оказания помощи, указав соответствующее назначение платежа при переводе пожертвования. Список программ и имена нуждающихся публикуются на сайте looktosee.ru.
5.5. При получении пожертвования с указанием фамилии и имени нуждающегося Благополучатель направляет пожертвование на помощь этому лицу. В том случае, если сумма пожертвований конкретному лицу превысит сумму, необходимую для оказания помощи, Благополучатель информирует об этом Жертвователей, размещая информацию на сайте looktosee.ru Благополучатель использует положительную разницу между суммой поступивших пожертвований и суммой, необходимой для помощи конкретному лицу, на уставные цели Благополучателя. Жертвователь, не согласившийся с переменой цели финансирования, вправе в течение 14 календарных дней после публикации указанной информации потребовать в письменной форме возврата денег.
5.6. При перечислении Пожертвования через электронную платежную систему с Жертвователя может взиматься комиссия в зависимости от выбранного способа оплаты (электронные деньги, смс-платежи, денежные переводы). Пожертвования, перечисляемые Жертвователем посредством электронной платежной системы, аккумулируются платежной системой на счетах системы, далее денежные средства общей итоговой суммой, собранной за определенный период, поступают на расчетный счет Фонда. С перечисляемой на расчетный счет Фонда денежной суммы электронная система может удерживать комиссию. Сумма поступивших в Фонд денежных средств будет равна сумме Пожертвования, сделанного Жертвователем, за вычетом комиссий, взимаемых платежной системой.
5.7. Жертвователь может оформить регулярное (ежемесячное) списание пожертвования с банковской карты.
Поручение считается оформленным с момента первого успешного списания пожертвования с банковской карты.
Поручение на регулярное списание действует до момента окончания срока действия карты владельца или до подачи Жертвователем письменного уведомления о прекращении действия поручения. Уведомление должно быть направлено на электронный адрес info@looktosee.ru не менее чем за 10 дней до даты очередного автоматического списания. Уведомление должно содержать следующие данные: фамилия и имя, как указано на банковской карте; четыре последний цифры карты, с которой осуществлялся платеж; электронный адрес, на который Благо получатель отправит подтверждение о прекращении регулярного списания.

6. Права и обязанности сторон

6.1. Благополучатель обязуется использовать полученные от Жертвователя по настоящему договору денежные средства строго в соответствии с действующим законодательством РФ и в рамках уставной деятельности.
6.2. Жертвователь даёт разрешение на обработку и хранение персональных данных, используемых Благополучателем исключительно для исполнения указанного договора, а также для информирования деятельности Благополучателя.
6.3. Согласие на обработку персональных данных дается Жертвователю на неопределенный срок. Согласие в любой момент может быть отозвано путем направления письма по адресу info@looktosee.ru. В случае отзыва согласия Благополучатель обязуется в течении 5 (пяти) рабочих дней уничтожить или обезличить персональные данные Жертвователя.
6.4. Благополучатель обязуется не раскрывать третьим лицам личную и контактную информацию Жертвователя без его письменного согласия, за исключением случаев требования данной информации государственными органами, имеющими полномочия требовать такую информацию.
6.5. Полученное от Жертвователя пожертвование, по причине закрытия потребности частично или полностью не израсходованное согласно назначению пожертвования, указанному Жертвователем в платежном поручении, не возвращается Жертвователю, а перераспределяется Благополучателем самостоятельно на другие актуальные программы, уставные цели Благополучателя.
6.6. По запросу Жертвователя (в виде электронного или обычного письма) Благополучатель обязан предоставить Жертвователю информацию о сделанных Жертвователем пожертвованиях.
6.7. Благополучатель не несет перед Жертвователем иных обязательств, кроме обязательств, указанных в настоящем Договоре.

7. Прочие условия

7.1. В случае возникновения споров и разногласий между Сторонами по настоящему договору, они будут по возможности разрешаться путем переговоров. В случае невозможности разрешения спора путем переговоров, споры и разногласия могут решаться в соответствии с действующим законодательством Российской Федерации в судебных инстанциях по месту нахождения Благополучателя.

8. Реквизиты

БЛАГОПОЛУЧАТЕЛЬ:
Межрегиональная общественная организация содействия и помощи больным с наследственными заболеваниями сетчатки «Чтобы видеть!»

Юр.адрес: 127422,г. Москва, Дмитровский проезд, дом 6, корпус 1,квартира 122,

ОГРН 1167700058283
ИНН 7713416237
КПП 771301001

Президент Байбарин К.А.

Наш сайт подключен к интернет-эквайрингу, и Вы можете внести пожертвование банковской картой Visa или Mastercard. После подтверждения выбранной суммы пожертвования, откроется защищенное окно с платежной страницей процессингового центра CloudPayments, где Вам необходимо ввести данные Вашей банковской карты. Для дополнительной аутентификации держателя карты используется протокол 3D Secure. Если Ваш Банк поддерживает данную технологию, Вы будете перенаправлены на его сервер для дополнительной идентификации. Информацию о правилах и методах дополнительной идентификации уточняйте в Банке, выдавшем Вам банковскую карту.

Гарантии безопасности

Процессинговый центр CloudPayments защищает и обрабатывает данные Вашей банковской карты по стандарту безопасности PCI DSS 3.0. Передача информации в платежный шлюз происходит с применением технологии шифрования SSL. Дальнейшая передача информации происходит по закрытым банковским сетям, имеющим наивысший уровень надежности. CloudPayments не передает данные Вашей карты нам и иным третьим лицам. Для дополнительной аутентификации держателя карты используется протокол 3D Secure.

В случае, если у Вас есть вопросы по совершенному платежу, Вы можете обратиться в службу поддержки клиентов по электронной почте support@cloudpayments.ru.

Безопасность онлайн платежей

Предоставляемая Вами персональная информация (имя, адрес, телефон, e-mail, номер кредитной карты) является конфиденциальной и не подлежит разглашению. Данные Вашей кредитной карты передаются только в зашифрованном виде и не сохраняются на нашем Web-сервере.

Безопасность обработки Интернет-платежей гарантирует ООО «КлаудПэйментс». Все операции с платежными картами происходят в соответствии с требованиями VISA International, MasterCard и других платежных систем. При передаче информации используется специальные технологии безопасности карточных онлайн-платежей, обработка данных ведется на безопасном высокотехнологичном сервере процессинговой компании.

Рнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что этоРнк терапия что это. Смотреть фото Рнк терапия что это. Смотреть картинку Рнк терапия что это. Картинка про Рнк терапия что это. Фото Рнк терапия что это

Федеральный закон РФ № 152-ФЗ «О персональных данных» — федеральный закон, регулирующий деятельность по обработке (использованию) персональных данных.

Интернет проект www.looktosee.ru (далее – URL, «мы») серьезно относится к вопросу конфиденциальности информации своих клиентов и посетителей сайта www.looktosee.ru (далее – «вы», «посетители сайта»). Персонифицированной мы называем информацию, содержащую персональные данные (например: ФИО, логин или название компании) посетителя сайта, а также информацию о действиях совершаемых вами на сайте URL. (например: заказ посетителя сайта с его контактной информацией). Анонимными мы называем данные, которые невозможно однозначно идентифицировать с конкретным посетителем сайта (например: статистика посещаемости сайта).

2. Использование информации

Мы используем персонифицированную информацию конкретного посетителя сайта исключительно для обеспечения ему качественного оказания услуг и их учета. Мы не раскрываем персонифицированных данных одних посетителей сайта URL другим посетителям сайта. Мы никогда не публикуем персонифицированную информацию в открытом доступе и не передаем ее третьим лицам Исключением являются лишь ситуации, когда предоставление такой информации уполномоченным государственным органам предписано действующим законодательством Российской Федерации. Мы публикуем и распространяем только отчеты, построенные на основании собранных анонимных данных. При этом отчеты не содержат информацию, по которой было бы возможным идентифицировать персонифицированные данные пользователей услуг. Мы также используем анонимные данные для внутреннего анализа, целью которого является развитие продуктов и услуг URL

Сайт www.looktosee.ru может содержать ссылки на другие сайты, не имеющие отношения к нашей компании и принадлежащие третьим лицам. Мы не несем ответственности за точность, полноту и достоверность сведений, размещенных на сайтах третьих лиц, и не берем на себя никаких обязательств по сохранению конфиденциальности информации, оставленной вами на таких сайтах.

4. Ограничение ответственности

Мы делаем все возможное для соблюдения настоящей политики конфиденциальности, однако, мы не можем гарантировать сохранность информации в случае воздействия факторов находящихся вне нашего влияния, результатом действия которых станет раскрытие информации. Сайт www.looktosee.ru и вся размещенная на нем информация представлены по принципу «как есть” без каких-либо гарантий. Мы не несем ответственности за неблагоприятные последствия, а также за любые убытки, причиненные вследствие ограничения доступа к сайту URL или вследствие посещения сайта и использования размещенной на нем информации.

По вопросам, касающимся настоящей политики, просьба обращаться по адресу info@looktosee.ru

Межрегиональная общественная организация содействия и помощи больным с наследственными заболеваниями сетчатки «Чтобы видеть!»

Юр.адрес: 127422, г. Москва, Дмитровский проезд, дом 6, корпус 1, квартира 122

Источник

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *